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選擇Agilent液相色譜柱前，了解過(guò)它嗎
更新時(shí)間：2022-01-20 點(diǎn)擊次數(shù)：1150次
Agilent液相色譜柱以乙烯醇共聚物為基質(zhì)的色譜柱，即使其載炭量很高也能保持表面的濕潤(rùn)。多孔結(jié)構(gòu)具有足夠大的平均孔徑，對(duì)小分子化合物、多肽和小分子蛋白能夠產(chǎn)生理想的分離效果。
在有機(jī)溶劑比例較高的流動(dòng)相中，該柱具有與硅膠基質(zhì)色譜柱相同的柱效，但在堿性緩沖溶液為流動(dòng)相條件下，其分離效率則超過(guò)硅膠色譜柱。顯著的特點(diǎn)之一是基質(zhì)被烷基化的填料的洗脫順序，其保留能力與碳鏈長(zhǎng)度成正比。
在選擇Agilent液相色譜柱之前，先多了解自己的樣品和雜質(zhì)，他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等。
1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測(cè)，即要選擇承受100%純水且對(duì)極性化合物保留很好的色譜柱。
2.如果樣品極性太強(qiáng)，或酸性太強(qiáng);可以選擇CN，NH2，或硅膠柱，HILIC(親水色譜)，也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱。
3.若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì)，且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過(guò)修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等)，他們都會(huì)減少堿性化合物的拖尾，一般會(huì)選擇中性或偏堿的條件下做，因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留。
4.如果堿性化合物的極性太強(qiáng)，或堿性太強(qiáng);可以選擇寬pH的Agilent液相色譜柱在高pH值檢測(cè)(優(yōu)點(diǎn)是方法開(kāi)發(fā)簡(jiǎn)單，缺點(diǎn)是目前實(shí)現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少，價(jià)格也高)或者選用也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱。
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